Xét nghiệm tpha là gì?

Bạn A. K, 28 tuổi có hỏi: "Em thấy khi nói về bệnh giang mai, người ta hay nói đến xét nghiệm tpha. Em thắc mắc không biết đây là kỹ thuật chuẩn đoán dùng để xác định bệnh thế nào. Mong được bác sĩ giải đáp: Xét nghiệm tpha là gì? tpha định tính và định lượng như thế nào? Em xin cảm ơn!"

Trả lời: Về những thắc mắc mà bạn A.K đã gửi về thì sau đây các chuyên gia của bacsionline.org sẽ giải đáp thắc mắc này cho bạn.

Xét nghiệm tpha là gì?

Xét nghiệm tpha là phương pháp dùng để phát hiện xem có kháng thể kháng lại xoắn khuẩn giang mai tồn tại trong huyết thanh của người bệnh hay không. Từ đó, để đi đến kết luận, bệnh nhân yêu cầu xét nghiệm có bị nhiễm giang mai hay không?

Xét nghiệm tpha dựa theo phản ứng ngưng kết. Nghĩa là, khi cho hồng cầu đã được gắn kháng nguyên có xoắn khuẩn giang mai, nếu cho tiếp xúc với huyết thanh của người nghi bị giang mai sẽ tạo thành phản ứng ngưng kết.

Nếu kết quả dương tính: Người bệnh đã bị mắc bệnh giang mai.

Nếu kết quả âm tính: Người bệnh không bị mắc bệnh giang mai.

Quy trình làm xét nghiệm tpha như thế nào?

Quy trình làm xét nghiệm tpha được tiến hành theo các bước sau:

Bước 1: Lấy bệnh phẩm của bệnh nhân theo đúng quy trình của ngành vi sinh đã đề ra.

Bước 2: Kiểm tra bệnh phẩm đã đạt yêu cầu chưa. Nếu chưa, yêu cầu lấy lại.

Bước 3: Tiến hành làm xét nghiệm dựa trên 2 phản ứng: TPHA định tính và định lượng.

Bước 4: Ra kết quả và trả về cho bác sĩ hoặc trực tiếp người bệnh.

TPHA định tính là gì?

TPHA là một trong những công đoạn của quy trình xét nghiệm TPHA chuẩn đoán bệnh giang mai. Các kỹ thuật viên sẽ dùng chất dẫn TPHA dựa trên phương thức định tính nhằm đưa ra kết luận người bệnh đó có hay không việc dương tính với xoắn khuẩn giang mai. Như vậy, công dụng của THPA rất rõ ràng, dùng để chuẩn đoán bệnh nhân có nhiễm giang mai không một cách nhanh chóng và chính xác nhất.

Cách sử dụng TPHA định tính như sau:

Để sinh phẩm ở nhiệt độ dùng bình thường.

Tiếp theo, pha loãng huyết thanh ra theo tỷ lệ chia 1:20: Hút 190 giọt dung dịch pha loãng cùng 10 giọt huyết thanh hòa trộn đều vào ống nghiệm 1.

Chuyển khoảng 25 giọt huyết thanh đã pha loãng vào tiếp ống nghiệm 2 và 3.

Nhỏ tiếp dung dịch tế bào không gắn kháng nguyên (tên tiếng ánh controll cell - Viết tắt CC) vào trong ống nghiệm 2 (có độ pha loãng với huyết thanh 1/80).

Sau khi nhỏ CC, tiếp tục nhỏ dung dịch tế bào gắn kháng nguyên Test Cell (viết tắt TC) vào ống nghiệm 3 (mức độ loãng của huyết thanh 1/80).

Bắt đầu lắc nhẹ phiến nhựa hay để máy phân tích rung ở một tốc độ nhất định trong khoảng thời gian 5 phút.

Đậy khay nhựa lại và tiếp tục giữ nguyên như vậy ở nhiệt độ phòng trong thời gian từ 45-60 phút.

Lưu ý: Nên để tấm vi lọc cách xa nhiệt, tránh ánh sáng chiếu vào. Hoặc tất cả các tác nhân gây rung lắc do môi trường bên ngoài. Kết quả sẽ hiển thị trong thời gian 24 giờ, trong điều kiện tấm vi lọc được bao phủ chắc chắn, cẩn thận.

TPHA định lượng là gì?

Cũng giống TPHA định tính, TPHA định lượng cũng là một bước của quá trình xét nghiệm TPHA nhằm trả lời cho câu hỏi: Bệnh nhân có mẫu xét nghiệm này có bị nhiễm bệnh giang mai không?

Cách tiến hành TPHA định lượng như sau:

Pha thật loãng huyết thanh theo tỷ lệ 1:20 (190 giọt dung dịch pha loãng và 10 giọt huyết thanh). Cho tất cả chúng vào ống nghiệm 1 và thực hiện trộn đều.

Nhỏ 25 giọt dung dịch pha loãng huyết thanh vão mỗi ống nghiệm, tính từ ống nghiệmsố thứ tự thứ 4-10.

Tiếp theo, chuyển thêm 25 giọt huyết thanh đã pha loãng vào ống nghiệm số 2,3.

Nhỏ 25 giọt huyết thanh đã pha loãng vào ống nghiệm 4, hòa đều. Sau đó, lại lấy 25 giọt đã pha ở ống nghiệm này. Tiếp tục lặp lại công đoạn này cho đến hết ống nghiệm số 10 thì dừng lại.

Hãy chắc chắn rằng Test cell cùng control cell đã được bao phủ hoàn toàn. Cho thêm 75 giọt control cell vào trong ống nghiệm 2, còn test cell đưa vào ống nghiệm số thứ tự tiếp theo.

Dùng tay đã đeo găng gõ nhẹ vào tấm vi lọc nhằm cho hỗn hợp được hòa trộn đều với nhau.

Lắc nhẹ và sau đó để nguyên như vậy ở nhiệt độ phòng.

Lưu ý: Hãy để tấm vi lọc cách xa nhiệt, hạn chế tối đa việc ánh sáng chiếu trực tiếp vào làm biến đổi chất, ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm.

Điều kiện chấp nhận xét nghiệm TPHA định tính và định lượng

Điều kiện chấp nhận kết quả phân tích xét nghiệm THPA định tính và định lượng được quy định như sau:

Bắt buộc phải âm tính với ống nghiệm chứa mẫu bệnh với dung dịch tế bào không gắn kháng nguyên: Biểu hiện bằng việc tế bào lắng xuống đáy ống nghiệm tạo thành 1 nút nhỏ (tỷ lệ 1:80).

Mẫu bệnh phẩm xét nghiệm ra chứng dương phải kết luận dương tính.

Mẫu bệnh phẩm xét nghiệm ra chứng âm phải kết luận âm tính.

Cách đọc kết quả sau khi xét nghiệm

Đặt phiến nhựa lên bề mặt phẳng, nhìn với lượng ánh sáng tự nhiên trực tiếp. Và so sánh cấu trúc ngưng kết của các mẫu thử bệnh phẩm với mẫu thử âm, dương tính có sẵn. Đối chiếu với kết quả đã được các nhà khoa học kiểm chứng trước đó. Sau đó đưa ra kết luận cho mẫu xét nghiệm.

Nếu kết xét nghiệm quả dương tính mạnh

Dung dịch tế bào không gắn kháng nguyên: Tế bào lắng đọng, tạo nên một lỗ nhỏ như nút ở dưới đáy.

Dung dịch tế bào gắn kháng nguyên: Tế bào ngưng kết lại, dàn mỏng 1 lớp bao phủ toàn bộ ở phần đáy ống nghiệm.

Nếu kết quả dương tính yếu

Dung dịch tế bào không gắn kháng nguyên: Tế bào lắng đọng, tạo nên một lỗ nhỏ như nút ở dưới đáy.

Dung dịch tế bào gắn kháng nguyên: Tế bào ngưng kết lại, dàn mỏng 1 lớp khoảng 1/3 ở phần đáy ống nghiệm.

Nếu kết quả âm tính

Dung dịch tế bào không gắn kháng nguyên: Tế bào lắng đọng, tạo nên một lỗ nhỏ như nút ở dưới đáy.

Dung dịch tế bào gắn kháng nguyên: Tế bào lắng đọng, tạo nên một lỗ nhỏ như nút ở dưới đáy.

Nếu kết quả không xác định

Dung dịch tế bào không gắn kháng nguyên: Tế bào lắng đọng, tạo nên một lỗ nhỏ như nút ở dưới đáy.

Dung dịch tế bào gắn kháng nguyên: Tế bào lắng đọng, tạo nên hình chiếc nhẫn bọc viền đều bao xung quanh.

Nếu kết quả cho phản ứng không đặc hiệu

Phản ứng dương tính với cả 2 loại dung dịch.

Trong trường hợp mẫu ngưng kết với ống nghiệm có chứa Controll cell và test cell thì phải làm lại mẫu theo các bước:

Nhỏ khoảng 100 microlit bệnh phẩm vào trong ống nghiệm.

Đổ tiếp 400 microlit control cell vào.

Trộn đều hỗn hợp và ủ trong 1 tiếng ở nhiệt độ phòng.

Tiếp theo, ly tâm 1000 vòng trong vòng 15 phút.

Dùng pipet và bóng thổi để hút lấy nước nổi ở trên bề mặt với tỷ lệ 1:5 nhằm tạo phản ứng.

Lưu ý: Nếu muốn pha loãng mẫu phải tính toán lại tỷ lệ từ đầu.

Trên đây là những chia sẻ của chúng tôi về: Xét nghiệm tpha là gì? Tpha định tính và định lượng như thế nào? Hy vọng, bài viết đã cung cấp thông tin đến bạn một cách đầy đủ, phục vụ việc tìm hiểu về vấn đề trên được rõ và sâu rộng hơn!